Métodos alternativos a la Experimentación Animal

Material de clase

Temas de Teoría

Tema 1. Experimentación animal. Bases éticas y legales de la experimentación con animales. Panorama actual en la Unión Europea y en el resto del mundo. Tema 1

Tema 2. Alternativas a la experimentación animal. Concepto de métodos alternativos. Clasificación. Organismos nacionales e internacionales sobre métodos alternativos. Validación de métodos. Información en la red. Tema 2

Tema 3. Técnicas in vitro: cultivos celulares. Biología de las células en cultivo. Equipamiento mínimo y consideraciones prácticas: bases metodológicas. Seguridad biológica. Aplicaciones. Buenas Prácticas de Laboratorio. Tema 3

Tema 4. Tipos de cultivos celulares (I). Cultivos primarios de explantes de órganos. Técnicas de obtención. Requerimientos básicos. Mantenimiento en el laboratorio. Tema 4

Tema 5. Tipos de cultivos celulares (II). Líneas celulares. Métodos de inmortalización y transformación celular. Mantenimiento en el laboratorio. Colecciones americana (ATCC) y europea (ECACC). Tema 5 -  Video Tema 5

Tema 6. Conservación de células. Crioconservación. Medios y tampones. Descongelación y puesta a punto de los cultivos. Tema 6

Tema 7. Estudio de los cultivos. Cinética de crecimiento. Patrones. Morfología. Ciclo celular. Expresión génica. Características bioquímicas. Muerte celular. Tema 7 -  Video Tema 7

Tema 8. Técnicas para el estudio de los cultivos. Microscopía óptica, electrónica, de fluorescencia y confocal. Citometría de flujo. Colorantes vitales. Análisis de imagen. Dicroismo circular. Difracción de rayos X. Microdisección por láser. Analizadores de secuencias y fragmentos de ADN. Preparación de las muestras. Tema 8 -  Video 1 Tema 8 -  Video 2 Tema 8

Tema 9. Ensayos con cultivos celulares. Tipos de ensayo: farmacológicos, toxicológicos, inmunológicos. Diseño experimental: consideraciones básicas. Ensayos de citotoxicidad basal y selectiva. Elección de dosis. Ensayos de toxicidad aguda y crónica. Bioindicadores. Evaluación de las alteraciones en el ciclo celular. Tipos de muerte: necrosis y apoptosis. Evaluación de las alteraciones morfológicas, genéticas y bioquímicas por agentes químicos. Tema 9 -  Video Tema 9

Tema 10. Valoración de resultados. Interpretación. Extrapolación. Validación. Complementación con otros métodos: experimentación animal u otras alternativas.  Tema 10